origin 质粒(质粒oriT)

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质粒中f1ori与ori区别


                

区别:f1 ori是f1噬菌体的ori,可以控制ssDNA(单链DNA)的复制;而ori则是质粒在大肠杆菌内的复制起点,在质粒序列上开始以滚环式复制的模式进行DNA复制,使得质粒可以在大肠杆菌中复制。


Ori是质粒的复制起点(也称origin),ori和它所控制的组分一起称为一个复制子。质粒中有两个origin:f1 ori和ori。


ori调控整个质粒在大肠杆菌中滚环式复制,使得质粒可以得到大量扩增。


根据质粒能否通过细菌的接合作用,可分为接合性质粒和非接合性质粒。接合性质粒带有与接合传递有关的基因。非接合质粒在一定条件下通过与其共存的接合质粒的诱动或转导而传递。


分类



根据质粒在细菌内的复制类型可分为两类:严紧控制型和松弛控制型。严紧控制复制型质粒的复制酶系与染色体DNA复制共用,只能在细胞周期的一定阶段进行复制,当细胞染色体停止复制时,质粒也就不再复制。


松弛控制复制型的质粒的复制酶系不受染色体DNA复制酶系的影响,在整个细胞生长周期中随时都可以复制,在染色体复制已经停止时质粒仍能继续复制。


根据质粒的不相容性,可分为不相容性和相容性。不相容性指结构相似、密切相关的质粒不能稳定地共存于同一宿主细菌内的现象,反之为相容性。常用于流行病学的调查。


以上内容来自 百度百科-质粒


质粒f1origin是什么?


                
F1 origin of replication plasmids for making single stranded DNA in bacteria infected with phage.

相当于是质粒的DNA单链复制起始位点.

质粒载体图谱上面的英文分别代表什么?


                

具体如下:


图谱中的ori表示质粒的复制起点。质粒的复制起点决定了质粒的宿主及质粒的拷贝数相关,它是质粒中的一段特定序列,富含AT和重复序列。


图谱中的AmpR、KanaR等表示质粒载体中的筛选标签,多为抗生素抗性基因,方便后续通过抗生素筛选阳性克隆。特点是单词最后会以大写R或上标r结束。


图谱中的MCS或者许多内切酶排排坐的部分,就是质粒的多克隆位点。多克隆位点为一系列限制性内切酶酶切位点,是外源DNA的插入位点,一般可通过酶切/连接的方式将外源DNA插入质粒。


相关信息:


质粒载体中除复制起始位点、筛选标记、多克隆位点外,还具有其他一些表达或调控元件,如转录调控元件、翻译调控元件和融合表达标签蛋白等。


蛋白纯化标签蛋白:His-Tag,GST-tag等。


蛋白检测标签蛋白:Myc-Tag,Flag-Tag,HA-Taq等。


荧光蛋白表达标签:GFP,mCherry等。


请教质粒中F1 origin和SV40 origin的功能


                
f1 originf1噬菌体基组DNA复制区序列(段DNA序列)引导单链DNA复制程 pUC origin质粒pUC复制区序列(段DNA序列)引导双链DNA复制程

质粒图谱4大要素


                

质粒解剖

  

质粒四大要素:
  

                                          

  

一、复制起点:控制着质粒的复制,并决定了质粒的宿主和拷贝数;

  

Ori 是质粒的复制起点(也称 origin ), ori 和它所控制的组分一起称为一个复制子, ori 调控整个质粒在大肠杆菌中滚环式复制,使得质粒可以得到大量扩增

  

质粒中有两个 origin 的,为穿梭质粒,既可以在原核细胞复制,也可在真核细胞中复制。

  

二、筛选标记: 多为抗性基因,以便加以检测筛选;

  

只存在单抗性的质粒多为原核克隆载体
   和原核表达载体。

  

而存在两种或以上的抗性的多为真核表达质粒,多为穿梭质粒

  

真核表达质粒不仅含 如AmpR ,还有如NeoR 筛选标记

  

三、多克隆位点: 外源基因的插入位点;

  

多克隆位点简称 MCS ,图谱中的 MCS 区
   或者许多内切酶集中的部分,就是质粒的多克隆位点,它一般位于转录启动和转录终止信号之间

  

多克隆位点是外源 DNA 的插入位点,一般可通过酶切后连接的方式将外源 DNA 插入质粒

  

四、其他件:如转录调控元件、翻译表达元件和蛋白标签等

  

质粒中除了复制起始位点、筛选标记、多克隆位点外,还具有其他一些表达或调控元件,

  

如,转录调控元件(启动子),

  

翻译调控元件

  

融合表达标签蛋白等

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